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基于叠氮溴化丙锭定量反转录聚合酶链式反应的甲型肝炎疫苗病毒滴度快速检测方法(PDF)

《中国病毒病杂志》[ISSN:2095-0136/CN:11-5969/R]

期数:
2020年第6期
页码:
421-425
栏目:
论著
出版日期:
2020-12-20

文章信息/Info

Title:
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作者:
卞莲莲王一平孙世洋
中国食品药品检定研究院,北京 102629
Author(s):
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关键词:
甲型肝炎疫苗叠氮溴化丙锭PMAPMAqRTPCR病毒滴度快速检测疫苗效力疫苗 质量控制
Keywords:
HepatitisAvaccinePropidium monoazide(PMA)PMAqRTPCRVirustiterRapiddetec tionmethodEfficacyofvaccineQualitycontrolofvaccine
分类号:
R373.2
DOI:
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文献标识码:
A
摘要:
:目的 建立快速检测甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的叠氮溴化丙锭定量反转录聚合酶链式 反应 (PMAqRTPCR)方法。方法 比较叠氮溴化丙锭 (PMA)浓度、光解时间、孵育温度和时间,以 及不同灭活方式、pH 值和添加剂预处理对 PMAqRTPCR 法检测的影响;进行线性、平行性、灵敏度、 重复性、相关性、特异性和初步适用性研究。结果 确定最适反应条件为 PMA 终浓度50μmol/L,4 ℃避 光孵育30min,光解30min,病毒液pH 值为1.48~7.43。方法学研究结果显示,该方法特异性良好;线 性范围为 5.0~8.0lgCCID50/ml,线 性 和 平 行 性 良 好;定 量 下 限 为 5.0lgCCID50/ml;重 复 性 变 异 系 数 (犆犞)为2.78%~3.58%;与法定方法检测结果具有显著相关性 (相关系数犚2=0.698)。初步适用性结果 显示,4个实验室使用各自细胞系检测同一样品结果差异无统计学意义 (犘=0.071~0.997);不同企业生 产的疫苗在不同细胞系上检测适用性良好。结论 建立了甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的 PMA qRTPCR方法,为冻干甲型肝炎减毒活疫苗的效力评价提供了快速检测方法。
Abstract:
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参考文献/References

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备注/Memo

备注/Memo:
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更新日期/Last Update: 1900-01-01